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傳統(tǒng)的抗體制備都是從抗原刺激免疫動(dòng)物產(chǎn)生強(qiáng)烈免疫應(yīng)答開始，其中單克隆抗體是從免疫動(dòng)物脾臟取B細(xì)胞與無(wú)限增殖的瘤細(xì)胞體外融合，對(duì)融合成功的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行亞克隆，從而根據(jù)應(yīng)用目的篩選對(duì)應(yīng)的細(xì)胞株，然后通過細(xì)胞培養(yǎng)或收集腹水進(jìn)一步純化得到抗體；而多···
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  • IP（protein A/G磁珠）實(shí)驗(yàn)常見問題及解決方案

    2022-06-20
    免疫沉淀（IP）是一種可以純化和富集目標(biāo)蛋白的沉淀技術(shù)，在蛋白質(zhì)組學(xué)研究中可用于識(shí)別蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)之間的相互作用。免疫沉淀是一種重要的技術(shù)，用于研究蛋白質(zhì)之間的存在、相對(duì)豐度、大小、上調(diào)或下調(diào)、穩(wěn)定性、翻譯后修飾（PTMs）以及相互作用。以下為免···
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  • ELISA實(shí)驗(yàn)中如何精確判斷顯色時(shí)長(zhǎng)，TMB顯色

    2022-06-20
    TMB顯色劑主要成分是二,二甲基聯(lián)苯胺（非致癌HRP底物），氧化失去電子后變成電子轉(zhuǎn)移復(fù)合物（TMB+和TMB）,復(fù)合物最大吸收峰652nm（藍(lán)色），當(dāng)加入酸性物質(zhì)后導(dǎo)致電子轉(zhuǎn)移復(fù)合物質(zhì)子化，迫使兩者分離出一分子的TMB(無(wú)色)，一分子TMB+(黃色琨，最大吸收峰450nm)···
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  • ELISA實(shí)驗(yàn)前樣本制備操作流程

    2022-06-20
    ELISA是一種快速、靈敏、準(zhǔn)確可靠的定性定量分析方法。樣本的處理對(duì)于Elisa實(shí)驗(yàn)的成功起著關(guān)鍵的作用。處理樣本的過程就是收集目標(biāo)蛋白的過程，由于蛋白容易變性，降解，故該過程應(yīng)盡量溫和。樣本處理之后的儲(chǔ)存也非常重要，尤其注意不要反復(fù)凍融。樣本處理之···
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